PLATELET-RICH PLASMA ENRICHED CARDIAC EXTRACELLULAR MATRIX HYDROGEL INDUCES H9c2 CARDIOMYOBLAST PROLIFERATION
Nome: EZIO HENRIQUE DA SILVA GOMES
Data de publicação: 16/02/2024
Banca:
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Papel |
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| BRENO VALENTIM NOGUEIRA | Orientador |
Resumo: Os hidrogéis injetáveis à base de matriz extracelular (ECM) são uma ferramenta em potencial a ser explorada como um procedimento minimamente invasivo e, para o reparo do tecido cardíaco. O hidrogel de matriz extracelular cardíaca (cECM) é um dos hidrogéis injetáveis mais promissores. O uso de hidrogéis é vantajoso porque permite a incorporação de diferentes substâncias e moléculas de interesse. Nosso grupo tem utilizado plasma rico em plaquetas (PRP), devido à sua fonte facilmente acessível de fatores de crescimento. Considerando o exposto acima, nosso objetivo foi desenvolver um hidrogel de matriz extracelular cardíaca enriquecido com PRP. Para atingir esse objetivo, o miocárdio de ventrículos suínos foi picado e descelularizado em dodecil sulfato de sódio (SDS) a 1% m/m em solução salina tamponada com fosfato 1× (PBS) por 5-6 dias, lavado extensivamente com água destilada, congelado em um ultrafreezer a -80°C e liofilizado. Em seguida, o material foi digerido enzimaticamente com pepsina e seu pH foi ajustado para 7,4. Em seguida, o PRP foi ativado, usando 330 µL de cloreto de cálcio (100 mg/mL) em 10 mL de PRP. Por fim, o PRP ativado foi incorporado ao gel em duas concentrações: 10% e 20% (v/v). Os materiais foram analisados para acessar o DNA residual, a análise histológica, MEV, FTIR, conteúdo de colágeno e biocompatibilidade em cardiomioblastos H9c2. Após o processo de descelularização, o DNA remanescente diminuiu de 758 (nativo) para 33 ng/mg de tecido seco e a análise histológica mostrou ausência de núcleos no tecido, demonstrando o sucesso desse processo e reduzindo as chances de reações de rejeição. A histoquímica e o conteúdo de colágeno mostraram a preservação do colágeno no scaffold após o processo de descelularização. Essa preservação do colágeno foi fundamental para a formação do gel, permitindo a formação de um scaffold nanofibroso, observado pela microscopia eletrônica de varredura. O encapsulamento do cardiomioblasto H9c2 no hidrogel induziu diferenciação e a suplementação com PRP a proliferação do cardiomioblasto H9c2. Os resultados obtidos neste trabalho indicam que a injeção de hidrogel de matriz extracelular cardíaca enriquecido com plasma rico em plaquetas ajudaria no reparo do tecido cardíaco após o infarto do miocárdio, uma vez que haveria maior indução dos mioblastos a proliferação e diferenciação.
