“TRANSMISSÃO POR INSETOS DO COMPLEXO Papaya meleira virus (PMeV e PMeV2) E PROSPECÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE UMA FRAÇÃO DA PROTEÍNA ESTRUTURAL DO PMeV”
Nome: JOELLINGTON MARINHO DE ALMEIDA
Data de publicação: 06/05/2024
Banca:
Nome |
Papel |
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| ALEXANDRE MARTINS COSTA SANTOS | Coorientador |
| ANDRE DA SILVA XAVIER | Examinador Externo |
| JOSE AIRES VENTURA | Examinador Interno |
| MARLONNI MAURASTONI ARAÚJO | Examinador Externo |
| PATRICIA MACHADO BUENO FERNANDES | Presidente |
Páginas
Resumo: A meleira do mamoeiro é uma doença ocasionada por vírus que pode levar a perda da produtividade dos pomares de Carica papaya nos principais países produtores, como Brasil, México, Equador e Austrália. A infecção da planta provoca a queima de folhas jovens, exsudação espontânea do látex e manchas no fruto. A oxidação do látex em contato com o ar dá origem a um aspecto “melado”, que junto com os demais fatores interferem na comercialização dos frutos. Entretanto, ainda não se conhece o vetor causador da doença da meleira do mamoeiro em todos os países produtores. Estudos realizados por diversos grupos de pesquisa têm apontado um vetor aéreo como potencial disseminador da doença; além da relação filogenética do vírus com fungos endofíticos e sua transmissão através de sementes de plantas de mamoeiro. No Brasil, é ocasionada pelo complexo viral papaya meleira virus (PMeV) e papaya meleira virus 2 (PMeV2), e a coexistência dos dois vírus comprovou que o PMeV2 é encapsidado pelo PMeV, e sabe-se que o PMeV possui dois quadros de leitura aberta (ORFs) responsáveis por codificar proteínas estruturais que compõem o capsídeo (ORF1) e uma proteína putativa RdRp (ORF2). Sabendo-se que as proteínas estruturais do PMeV são responsáveis por encapsidar os dois materiais genéticos, fazer-se o emprego da expressão de uma fração da proteína recombinante da proteína capsidial (CP) do PMeV pode se tornar viável na elaboração de testes rápidos, identificação das partículas virais em diferentes locais da planta e potencial aplicação em estudos de transmissão vírus-planta-vetor. No presente estudo, foi realizado o desenvolvimento de um material sobre a compreensão de possíveis meios da transmissão viral do complexo papaya meleira virus utilizando a literatura disponível, associando como o desenvolvimento de testes rápidos de diagnóstico podem auxiliar na detecção do vírus na planta e em outros organismos. Assim, uma fração da proteína capsidial do PMeV foi expressada em E. coli BL21(DE3) e realizada sua extração a partir do gel de SDS-PAGE. A fração proteica foi expressa em quatro tempos (30 minutos, 1 hora, 2 horas e 4 horas) para verificar qual corresponderia a sua maior produção e sua fração extraída conduzida a produção de anticorpos policlonais. A partir da sequência disponível foi realizado uma caracterização in silico para verificação de sua composição de aminoácidos, estrutura tridimensional, físico-química e predição de peptídeos imunogênicos possíveis de serem identificados em sua sequência primária. Os resultados obtidos possibilitam o design de um teste rápido que seja eficaz e a utilização de anticorpos que podem ser aplicados em estudos futuros de localização do vírus em diferentes partes da planta.
