PRESERVAÇÃO DE AMOSTRAS DE FOLHAS DO MAMOEIRO PARA DETECÇÃO MOLECULAR DOS VÍRUS DA MELEIRA (PMeV E PMeV2)
Nome: ANA PAULA DE JESUS SANTANA
Data de publicação: 27/03/2024
Banca:
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Papel |
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| JOSE AIRES VENTURA | Orientador |
Resumo: A doença da meleira do mamoeiro é ocasionada pelo complexo viral papaya meleira virus (PMeV e PMeV2). A estratégia de controle da doença é a identificação das plantas sintomáticas que são retiradas do campo através da técnica de roguing. No entanto, frequentemente há a necessidade da confirmação molecular de plantas suspeitas de estarem infectadas. Aprimorar técnicas de manutenção do vírus em amostras de material biológico, como a herborização, podem viabilizar o transporte das amostras para diagnóstico e auxiliar em estudos de genômica viral em escala temporal. O objetivo deste trabalho foi avaliar uma metodologia de coleta, preservação e armazenamento de amostras de folhas de mamão infectadas pelo complexo dos vírus da meleira para diagnóstico molecular. Foi determinada a eficiência da herborização e o armazenamento na conservação de amostras de folhas de mamoeiro para diagnóstico. As amostras foram coletadas manualmente, fazendo o corte das folhas jovens, preferencialmente com lesões apicais características dos sintomas da meleira. Um total de 48 amostras foram separadas em dois grupos armazenados de forma diferentes, sendo 24 mantidas em ultrafreezer e 24 herbarizadas, que por sua vez foram subdivididas em dois subgrupos com 12 amostras de assintomáticas (UM e HM) e 12 amostras sintomáticas (UA e HA). As análises por diagnóstico molecular dos vírus PMeV e PMeV2 foram realizadas com intervalos de zero (T0), cinco (T5), dez (T10), vinte (T20) e quarenta (T40) dias, após o armazenamento. Observou-se que em T20 e T40 todas as amostras demonstraram a presença do complexo viral PMeV em ambas as formas de conservação. Entretanto, as análises nos tempos T5 e T10 não obtiveram um padrão uniforme para identificação do vírus possivelmente relacionado à distribuição não uniforme dos vírus nas células das folhas de mamoeiro. Os resultados validaram uma metodologia alternativa para a recomendação de um novo protocolo de preservação e armazenamento de amostras com baixo custo e fácil execução, para o diagnóstico molecular da meleira do mamoeiro.
