DETECÇÃO DE DNA MASCULINO EM AMOSTRAS DE CRIMES SEXUAIS POR PCR EM TEMPO REAL

Nome: CRISTINA WINKLER

Data de publicação: 14/03/2024

Banca:

Nomeordem decrescente Papel
DEBORA DUMMER MEIRA Coorientador
ELDAMARIA DE VARGAS WOLFGRAMM DOS SANTOS Examinador Interno
ELIZEU FAGUNDES DE CARVALHO Examinador Externo
IURI DRUMOND LOURO Presidente

Resumo: A inserção de perfis genéticos em bancos de dados de DNA revolucionou a investigação de crimes sexuais. Antes dessa ferramenta, só era possível investigar casos com agressores sexuais conhecidos. No Brasil, o uso de bancos de dados de DNA é recente, e, por isso, o processamento de amostras de casos sem suspeitos não era considerado importante até então. Por essa razão, os laboratórios forenses de DNA brasileiros têm uma grande quantidade de vestígios não analisadas. Nesse contexto, aumentar o número de perfis genéticos inseridos nos bancos de dados pode contribuir para reduzir esses atrasos e resolver casos antigos. No entanto, as práticas atuais de análise de DNA geralmente se concentram em casos em que o sêmen está
presente e, na maioria dos casos, esse material biológico não é detectado. A PCR em Tempo Real é uma técnica com alta sensibilidade, especificidade e já amplamente utilizada na rotina das análises forense. Assim, este projeto teve como objetivo avaliar a viabilidade técnica da PCR em Tempo Real como um método de triagem de material biológico masculino em amostras de suabes de mulheres vítimas de agressão sexual. Após testes de rotina para triagem de esperma no Laboratório de Biologia Forense da Polícia Civil do Espírito Santo, 176 amostras de suabes foram analisadas usando quatro diferentes ensaios de PCR em Tempo Real. Foi realizada a quantificação de DNA usando um kit comercial com sondas TaqMan e três diferentes reações de qPCR-duplex in house com corante SYBR Green. No ensaio de quantificação de DNA, entre as 84 amostras com resultados negativos para a triagem de sêmen, 39 (46,4%) apresentaram DNA masculino. Os três ensaios de qPCR-duplex baseados em SYBR
Green não mostraram a mesma sensibilidade que a quantificação de DNA com sondas TaqMan. Este estudo demonstrou que o uso da PCR em Tempo Real pode ser uma ferramenta robusta para detectar o DNA masculino como um método de triagem para identificar o contato masculino em casos de agressão sexual.

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